Rekonstytucja hematopoezy po chemioterapii wysokimi dawkami przez autologiczne komórki progenitorowe wytworzone ex Vivo

Hematopoetyczne komórki progenitorowe we krwi obwodowej są coraz częściej wykorzystywane do przywracania tworzenia się krwi po chemioterapii wysokimi dawkami guzów litych lub nowotworów hematologicznych.1 W porównaniu z ratowaniem za pomocą autologicznych przeszczepów szpiku kostnego, odbudowa takimi komórkami skraca okres pancytopenii i zmniejsza ryzyko infekcji i krwawienia.2-4 Jednak pobieranie komórek progenitorowych krwi obwodowej wymaga usunięcia dużej objętości krwi przez leukaferezę. Aby zminimalizować zanieczyszczenie kolekcji komórek progenitorowych krwi obwodowej przez komórki nowotworowe, 5,6 opracowaliśmy metodę hodowli komórek progenitorowych ex vivo ze stosunkowo małej objętości krwi. Kombinacja czynnika z komórkami macierzystymi, interleukiny-1., interleukiny-3, interleukiny-6 i erytropoetyny sprzyja wzrostowi klonogennych komórek progenitorowych i utrzymuje prymitywne hematopoetyczne komórki macierzyste ex vivo .7,8 Badania przedkliniczne sugerują, że hematopoetyczne komórki progenitorowe w krew obwodowa, zidentyfikowana przez marker powierzchniowej CD34, mogła być hodowana w hodowli tkankowej z cytokiną, a następnie stosowana do rekonstytucji krwiotwórczej po chemioterapii wysokimi dawkami.
W tym badaniu zbadaliśmy zdolność komórek progenitorowych krwi obwodowej CD34 + generowanych ex vivo w celu przywrócenia hematopoezy u pacjentów poddawanych chemioterapii wysokimi dawkami guzów litych. Dziesięciu pacjentów otrzymało przeszczepy autologicznych komórek progenitorowych, które wyhodowano ex vivo z 11 milionów komórek CD34 + krwi obwodowej, liczbę, która odpowiada mniej niż 10 procent zwykłego przygotowania takich komórek wykorzystywanych w leukaferezie.9 Wykazaliśmy wykonalność tego i wykazać, że hodowane komórki progenitorowe ex vivo mogą pośredniczyć w szybkim i trwałym odzyskaniu hematologicznym po podaniu dużej dawki etopozydu (1500 mg na metr kwadratowy powierzchni ciała), ifosfamidu (12 g na metr kwadratowy), karboplatyny ( 750 mg na metr kwadratowy) i epirubicyny (150 mg na metr kwadratowy). Schemat rekonstytucji był identyczny z odtwarzaniem hematopoezy w kontrolach historycznych, którzy byli leczeni w naszej instytucji nierozdzielonymi komórkami jednojądrzastymi lub pozytywnie wybranymi komórkami CD34 +.
Metody
Wybór pacjentów
Tabela 1. Tabela 1. Charakterystyka pacjentów. Dziesięciu pacjentów z zaawansowanym rakiem, którzy kwalifikowali się do chemioterapii w dużych dawkach, włączono do tej fazy 1-2 badania. Protokół został zatwierdzony przez komisję odwoławczą instytucji, a także przez samorząd lokalny (Regierungspräsidium z Fryburga, Niemcy). Charakterystykę pacjentów przedstawiono w Tabeli 1. Ocena stanu poprzedzającego leczenie wykazała, że 3 z 10 pacjentów miało wcześniej radioterapię lub chemioterapię, ale odzyskanie hematologiczne tych pacjentów po chemioterapii wysokimi dawkami nie różniło się od wyleczenia. u pozostałych 7 pacjentów.
Chemioterapia indukcyjna i mobilizacja komórek progenitorowych
Wszyscy pacjenci otrzymywali dwa cykle chemioterapii indukcyjnej w odstępie trzech tygodni, składające się z etopozydu (500 mg na metr kwadratowy), ifosfamidu (4 g na metr kwadratowy), cisplatyny (50 mg na metr kwadratowy) i epirubicyny (50 mg na metr kwadratowy ), wcześniej wykazano, że jest aktywny wobec różnych nowotworów.10 Dwadzieścia cztery godziny po drugim cyklu chemioterapii pacjenci otrzymywali filgrastym (czynnik stymulujący kolonie granulocytów lub G-CSF [Neupogen, Amgen, Monachium, Niemcy ]) w dawce 5 .g na kilogram masy ciała podskórnie w celu leczenia neutropenii związanej z chemioterapią i mobilizacji komórek progenitorowych krwi obwodowej9, które zostały zebrane w pojedynczej leukaferezie, w której przetworzono 6 litrów krwi.9 Komórki CD34 + były dodatnio wybrane przez kolumny immunoadsorpcyjne (Ceprate SC system, CellPro, Bothell, Wash.), jak opisano w innym miejscu.4 Odzyskano medianę 2,8 miliona komórek CD34 + na kilogram masy ciała; średnia (. SD) czystość wybranej frakcji komórek CD34 + wynosiła 72,1 . 9,3 procent, z wydajnością 64 procent.
Ex Vivo Wzrost pozytywnie wybranych komórek CD34 +
Wyjściowa populacja dla wzrostu ex vivo składała się z 15 milionów komórek po selekcji markera powierzchniowego CD34, co odpowiada medianie 11 milionów komórek CD34 + (mniej niż 2 x 105 komórek CD34 + na kilogram masy ciała pacjenta)
[hasła pokrewne: lorafen cena, tabela pomiarów ciśnienia tętniczego, odbudowa kości szczęki ]